化学发光法主要生产工艺

三、主要生产工艺（以微孔板载体的化学发光酶分析为例进行描述）

（二）滴配过程

1．酶结合物（也称酶标记物）的制备（根据各产品实际情况，该步骤可不进行）

采用常规钠——乙二醇法将相关的（或抗原）标记辣根过氧化物酶（或其他酶），酶标记后的（或抗原）应加入适当的保护剂保存于低温。

常规质控项目：标记方法，过程控制。

2．酶结合物的鉴定

（1）功能性实验

将酶结合物用酶稀释液稀释后，用于产品的滴配，其结果应符合相关试剂盒的质量标准。

（2）稳定性

将酶结合物用酶稀释液稀释，进行2～8℃，及热稳定性实验，滴配结果应符合相关试剂盒的质量标准。

3．酶结合物稀释液

按酶结合物稀释液的配方配制，存放在2～8℃保存，多重PCR体外诊断试剂车间，并于规定时间内使用。

常规质控项目：酶结合物稀释液配方，pH值。

4．酶结合物工作浓度的滴配

取酶结合物，用酶结合物稀释液稀释到不同的浓度，用已制备好的反应板进行滴配。测定系列标准品及相应的质控品，确定使体系达到优的酶结合物工作浓度。

5．酶结合物工作液配制

将所需量酶结合物和酶结合物稀释液按滴配浓度混合均匀。

质检项目：分装前检验，用配套的反应板进行检验，外观、灵敏度、质控品测定值、定量产品应作校准品线性检测。

6．酶结合物工作液的分装

按工艺要求分装酶结合物工作液。

常规质控项目：分装前确认试剂名称、批号、数量，分装量，封装后密封性。

7．酶结合物工作液（半成品）检验

对分装后的酶结合物工作液进行抽样检验，外观、分装量、灵敏度、校准品剂量-反应曲线线性、质控品测定值。

《体外诊断试剂-医疗器械生产质量管理规范附录 》厂房与设施的要点分析

　2015年7月10日，国家食品药品监督管理总局（CFDA）发布《医疗器械生产质量管理规范附录-体外诊断试剂》。CFDA公告说明，本附录是体外诊断试剂生产质量管理规范的特殊要求。体外诊断试剂生产质量管理体系应当符合《医疗器械生产质量管理规范》及本附录的要求。

　　为此，汇龙净化团队依据多年法规经验，流式细胞体外诊断试剂车间，从人员、厂房与设施、设备、设计开发、采购、生产管理、质量控制等七个方面，对新版医疗器械生产质量管理规范附录和原体外诊断试剂生产实施细则之间的变化进行专业分析。

   从总体来看，新版生产质量管理规范体系诊断试剂细则的重要更改并不是很多，汇龙净化温馨提示要留意：各飞检缺陷通报、地方文件（留样、纯水、空压）等.

    其中，“二、厂房与设施”是重点，因为硬件要求直接影响到我们汇龙净化给您厂房初步平面布局规划，厂房与设施合规才能避免您可能的整改（体考、生产许可、飞检），否则有时整改难度大时装好的车间就可能无法改了，下面依此先后陈述。

二、厂房与设施

　　2.1、明确洁净室的门应向洁净度高的方向开启；

　　2.2、洁净室级别中，增加了浮游菌的限度标准；

　　2.3、明确洁净区照明灯具不得悬吊；

　　2.4、明确洁净区水池、地漏应防止倒灌，100级不得设置地漏；

　　2.5、增加对生物安全柜过滤器性能进行定期检查的要求；

　　2.6、PCR试剂，生产和检验可以在“独立的建筑或空间”内进行，保证空气不直接联通即可；

　　2.7、删除了旧条款中“照明度300勒克斯”；

　　2.8、删除了旧条款中明确要求的一些功能间“称量间、备料间、物料脱外包装间、净化室”等；9、删除了“新建、改建、扩建的洁净厂房，应提供有资质的设计单位设计的图纸”。

三、设 备

　　3.1、明确空气净化系统需要“确认”，一定周期后进行“再确认”；

　　3.2、明确空气净化系统“应保持连续运行”，体外诊断试剂车间，停机后再开启，应进行必要的“测试或验证”；

　　3.3、明确生产中使用的工艺用水，应配备相应的制水设备。用量大时，通过管道输送至用水点；

　　3.4、新增对冷藏、冷冻产品运输设施的温度要求。

一、人 员

　　1.1、增加对“技术管理人员”的专业知识要求；

　　1.2、取消了管理人员需要“大专以上学历”的明确规定；

　　1.3、管理人员的专业范围，删除了“生物化学、微生物学”；

　　1.4、强调了对人员进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业、人员净化等方面的培训；

　　1.5、明确指出“患有传ran染性和感ran染性疾病的人员不得从事直接接触产品的工作”；

　　1.6、体检人员范围增加“直接接触物料”的人员；

　　1.7、删除了旧条款中“不得裸手直接接触物料”，改为“裸手接触产品的操作人员每隔一定时间应当对手再次进行消毒。裸手消毒剂的种类应当定期更换。”；

　　1.8、对工作服的清洗，质谱体外诊断试剂车间，无具体要求。旧条款要求“不同洁净级别的工作服要分别清洗、整理。万级以上的工作服，应当在洁净区洗涤、干燥、整理，按要求灭菌”。

四、设计开发

　　4.1、对设计开发过程中应具备的记录进行了详细要求。具体包括：设备、仪器和试剂的使用记录；主要原材料、中间体、重要辅料的数量、使用量及剩余量记录；各阶段样品数量、贮存条件、留样、使用或销毁记录。

六、 生产管理

　　6.1、删除了无规定使用期限的物料“一般不超过三年”的规定；

　　6.2、增加对“生产设备所用的润滑剂、清洗剂不得对产品造成污染”的要求；

　　7.3、增加“连续停产不足一年的，如有必要，也应重新对生产环节和设施设备进行验证”的要求；

　　7.4、新增“对生产用需要灭活的血清或血浆建立灭活处理”的要求。

五、采 购

　　无重大变化

七、 质量控制

　无重大变化

八、销售和售后服务

九、不合格品控制

十、不良事件监测、分析和改进

化学发光法原理

化学发光分析(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的反应相结合，用于各种抗原、、、酶、脂肪酸、维生素和等的检测分析技术。化学发光分析包含两个部分，即反应系统和化学发光分析系统。反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原或上，或酶作用于发光底物。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时，同时发射出光子，利用发光信号测量仪器测量光产额，该光产额与样品中的待测物质的量成正比，由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量。